今天給大家推薦的是研錦家核心技術(shù)——LSPR分子互作技術(shù)：LSPR局域等離子共振技術(shù)是以納米金顆粒為檢測單位的新一代SPR技術(shù)。LSPR一系列的技術(shù)優(yōu)勢使得該項(xiàng)技術(shù)有望成為生命科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)必備的技術(shù)平臺支撐。

01 LSPR局域等離子共振技術(shù)優(yōu)勢

不同于傳統(tǒng)SPR技術(shù)檢測折射率改變引起的SPR角度的偏轉(zhuǎn)，LSPR檢測的是納米金顆粒表面分子層厚度的變化產(chǎn)生的光吸收峰的位移。

由于光波長的變化受環(huán)境影響小，對體積、溫度、緩沖液折射率等變化干擾不敏感，因此該系列產(chǎn)品的檢測結(jié)果在保證了與傳統(tǒng)SPR技術(shù)相近的精確度和靈敏度的同時，采用更為簡易的光路系統(tǒng)及操作過程，極大地降低了SPR技術(shù)的實(shí)驗(yàn)門檻，可再生的芯片同時降低了后期使用的各項(xiàng)成本 。

此一系列的優(yōu)勢使得LSPR技術(shù)有望成為生命科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)必備的技術(shù)平臺支撐。

02分子互作平臺應(yīng)用領(lǐng)域

免疫學(xué)應(yīng)用

可用于鑒定蛋白類藥物體內(nèi)抗體產(chǎn)生、早期心機(jī)梗塞心型脂肪酸束縛蛋白質(zhì)（H-FABP）癌癥病人體液、組織液成分快速分析、以建立臨床分析數(shù)據(jù)庫，快速確定癌癥標(biāo)志物與疾病或機(jī)體功能相互的蛋白、核酸、脂類等相互作用檢測。

抗體檢測 

  ◆ 抗體活性鑒定

  ◆ 高通量篩選：抗體庫，抗體藥物篩選

  ◆ 表達(dá)蛋白相互作用

  ◆ 提取蛋白相互作用 

  ◆ 粗提抗體偶聯(lián)檢測和相關(guān)的定量 

  ◆ 抗體質(zhì)量控制 

  ◆ 抗體藥物開發(fā)

蛋白研究

  ◆ 通過OpenSPR檢測蛋白間的相互作用以確定機(jī)動性

  ◆ 檢測Kon、Koff,和Kd值（親和性） 

  ◆ 不同發(fā)育階段蛋白數(shù)量水平

  ◆ 不同表達(dá)水平的蛋白數(shù)量水平 

  ◆ 蛋白偶聯(lián)或非偶聯(lián) 

  ◆ 蛋白/抗體是否存在

  ◆ 粗提抗體滴度水平

  ◆ 配體偶聯(lián)配對篩選

  ◆ 蛋白相互作用特異性分析

藥理學(xué)檢測

  ◆ 藥物發(fā)現(xiàn)-- 頭孢他啶小分子蛋白相互作用動力學(xué)分析

  ◆ 小分子開發(fā) 

  ◆ 表達(dá)蛋白相互作用 

  ◆ 分離或提取蛋白的相互作用

  ◆ 篩選配體偶聯(lián) O頭孢他啶等小分子研究

其他應(yīng)用

  ◆ 生物傳感器開發(fā)和優(yōu)化 

  ◆ 納米材料合成評估及質(zhì)量控制 

  ◆ 納米材料特性檢測 

  ◆ 探測定位表面等離子共振 

  ◆ 開發(fā)潛在的物理性等離子體 

  ◆ 比色感應(yīng)檢測 

  ◆ 教學(xué)應(yīng)用

碳水化合物結(jié)合動力學(xué)

◆ 檢測Kon、Koff,和Kd值（親和性） ◆ 碳水化合物水平◆ 分子偶聯(lián)與否 ◆ 碳水化合物存在檢測 ◆ 分子相互作用特異性檢測

核酸、配體分析

  ◆ 核酸與蛋白相互作用

  ◆ 核酸與配體相互作用

  ◆ 配體質(zhì)量控制 

  ◆ 藥物發(fā)現(xiàn)

  ◆ 粗提裂解物偶聯(lián)水平和相對定量

  ◆ 治療和診斷應(yīng)用

脂質(zhì)體研究

  ◆ 表達(dá)蛋白質(zhì)的相互作用 

  ◆ 提取蛋白質(zhì)的相互作用

  ◆ 膜蛋白 

  ◆ 脂質(zhì)鏈 

  ◆ 囊泡與脂質(zhì)影響

LSPR在應(yīng)用中發(fā)表的文獻(xiàn)：

1. Comparison of Two Docking Methods for Peptide-Protein Interactions. (Journal of the Science of Food and Agriculture .09 Jan 2018) LSPR在蛋白與多肽研究中應(yīng)用

2. Ameliorating mitochondrial dysfunction restores carbon ion-induced cognitive deficits via co-activation of NRF2 and PINK1 signaling pathway (Redox Biolog, July 2018, Pages 143-157) LSPR在CO-IP中應(yīng)用

3. Targeted Delivery to Tumor-associated Pericytes via an Affibody with High Affinity for PDGFRp Enhances the in vivo Antitumor Effects of Human TRAIL (Theranostics 2017; 7(8):2261-2276.doi:10.7150/thno.l9091) LSPR在抗體藥物研發(fā)中應(yīng)用

4. Crosstalk between p38 MAPK and caspase-9 regulates mitochondria-mediated apoptosis induced by tetra-a-(4-carboxyphenoxy) phthalocyanine zinc photodynamic therapy in LoVo cells. (Oncology Reports 39(1) November 2017 DOI:10.3892/or.2017.6071) LSPR在抗腫瘤藥物與信號通路研究中應(yīng)用

5. Structural Studies of a Complex Between Endothelial Nitric Oxide Synthase and Calmodulin at Physiological Calcium Concentration. (Biochemistry 55(42):5962-5971 .October 2016 DOI:10.1021/acs.biochem.6b00821) LSPR在蛋白結(jié)構(gòu)與功能研 究中應(yīng)用

6. Study on neuroprotective effect of schisandrin B by regulating the A口 and its downstream NF-kB/TNF-apathway. LSPR在藥 物作用機(jī)理研究中應(yīng)用

7. The structure, kinetics and interactions of the p-carboxysomal p-carbonic anhydrase, CcaA.(《Biochemical Journal》, 2016,473 (24) LSPR在蛋白作用位點(diǎn)研究中應(yīng)用

8. Stable ligand-free stellated polyhedral gold nanoparticles for sensitive plasmonic detection R. Keunen, D. Macoreetta, N. Cathcart, and V. Kitaev, Nanoscale

9. Gold-plated silver nanoparticles engineered for sensitive plasmonic detection amplified by morphological changesK. Hobbs, N. Cathcart, and V. Kitaev, Chemical Communications.

10. Investigating binding kinetics of RNA aptamers via the Open SPR system (Poster). V. La, T. Dieckmann, Rustbelt RNA Meeting Sandusky, United States

11. Dynamics of Calmodulin's Interaction with Nitric Oxide Synthase at Physiological Calcium Concentrations (Presentation).M. Piazza and G. Guillemette, Laurier Protein Science Symposium, Waterloo, Canada.

03與傳統(tǒng)SPR媲美的實(shí)驗(yàn)結(jié)果精度

用OpenSPR，Biacore，Biacore三款儀器分別對相同的配體M1，M2做檢測，分析結(jié)果顯示，三款儀器具有可比的相似的信噪比。

從結(jié)果上我們可以看到，與全球生物感應(yīng)器分子親和性標(biāo)準(zhǔn)研究結(jié)果對比，其通過150個客戶分析同樣的蛋白與抗體相互作用的KD值，最終的KD結(jié)果為0.62nm＋/－0.98nm，因此，表明這三款儀器的結(jié)果在誤差上是一致的，這個誤差在實(shí)驗(yàn)中因儀器、條件及使用者不同是可預(yù)估的，因此也證明了OpenSPR相對其它系統(tǒng)更可靠。

04 LSPR分子互作平臺核心競爭優(yōu)勢

●  滿足不同實(shí)驗(yàn)需求：10種芯片，針對不同配體與分析體的相互作用檢測，包括空白納米金、COOH、NH2、NTA、Streptavidin、Biotin

●  抗干擾能力強(qiáng)：檢測不受溫度、緩沖液折射率等外界環(huán)境影響

●  功能強(qiáng)大：可用于蛋白、核酸、脂類、多肽等大小分子相互作用分析

●  應(yīng)用領(lǐng)域廣泛：生化、藥物開發(fā)、腫瘤研究，免疫學(xué)研究、抗體工程等

05 LSPR分子互作案例分享

案例1. PDGEFβ在腫瘤組織外膜細(xì)胞高表達(dá)，ZPDGFR β affibody親和體能介導(dǎo)與hTRAIL 與PDGEFβ作用

為了確定PDGEFβ 與Z PDGFR β affibody關(guān)系，利用LPSR 技術(shù)檢測了兩者相互作用，發(fā)現(xiàn)他們之前存在很高的親和力，從而證明了hTRAIL 與PDGFRβ作用依賴于Z PDGFR β親合體，并且在小動物活體上也做了驗(yàn)證，此實(shí)驗(yàn)是我們花了一天時間給老師做DEMO 得出的數(shù)據(jù)，便幫老師發(fā)了一個高影響因子的文獻(xiàn)，足以證明我們Nicoya OpenSPR 分子互作分析儀檢測的準(zhǔn)確性及高效性。

案例2.大腸癌LoVo細(xì)胞中脂鯉α（羧苯氧基)酞菁鋅光動力學(xué)治療誘導(dǎo)的p38 MAPK / caspase-9調(diào)節(jié)線粒體調(diào)節(jié)的凋亡 的相互作用

為了證實(shí)脂鯉α（羧苯氧基)酞菁鋅處理的細(xì)胞中p38 MAPK / caspase-9相互作用增強(qiáng)，利用LSPR 的在線IP檢測方法，將抗體固定到芯片上，裂解液過芯片，發(fā)現(xiàn)處理組信號明顯高于對照組信號，同時用傳統(tǒng)IP方法做了驗(yàn)證，結(jié)果一致。

LSPR檢測方法具有快速簡單；靈敏度高等特點(diǎn)，將傳統(tǒng)2-3天的實(shí)驗(yàn)縮短到35min左右。

案例3.揭示五味子素保護(hù)神經(jīng)元受損的詳細(xì)機(jī)制

五味子乙素Sch B能夠靶向親和Aβ配體，找到了信號通路的起源點(diǎn)，之后通過一系列方法反向， Sch B促進(jìn)Aβ寡聚體的解聚，減少磷酸化Tau蛋白的含量，下調(diào)下游NF-κB/TNF-α信號通路的表達(dá)，抑制神經(jīng)元線粒體凋亡，減輕Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)炎性反應(yīng)和神經(jīng)毒性，保護(hù)受損神經(jīng)元，從而詳細(xì)的解析五味子素保護(hù)神經(jīng)元受損的詳細(xì)機(jī)制。