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真核表達(dá)系統(tǒng)

哺乳動物細(xì)胞系統(tǒng)

能誘導(dǎo)高效表達(dá)，對表達(dá)的蛋白進(jìn)行正確折疊，并進(jìn)行復(fù)雜糖基化修飾，蛋白活性接近于天然蛋白，不需去除內(nèi)毒素，周期較長，操作復(fù)雜，需要細(xì)胞房，無菌，成本投入高

瞬時轉(zhuǎn)染

能夠快速靈活的制備活性蛋白，周期為 3-4 天；外源基因不能整合到細(xì)胞上，不能穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白，不適合大批量表達(dá)蛋白

哺乳動物系統(tǒng)是基因工程藥物的生產(chǎn)平臺，適用于新基因的發(fā)現(xiàn)，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的研究。是真核表達(dá)系統(tǒng)中成本最昂貴的但是也是唯一可以表達(dá)復(fù)雜蛋白基因的系統(tǒng)

穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建

外源基因能在細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)，篩選出的穩(wěn)定細(xì)胞株能夠?qū)崿F(xiàn)蛋白的大量生產(chǎn)篩選困難且時間長，投入大

酵母表達(dá)系統(tǒng)

遺傳背景清楚，操作較為簡便，容易進(jìn)行遺傳操作，有較為完善的真核蛋白表達(dá)控制系統(tǒng)

畢赤酵母表達(dá)

能大規(guī)模真核表達(dá)蛋白，可表達(dá)出克級蛋白；甲醇誘導(dǎo)操作方面需要時間；甲醇毒性大，不適用于生產(chǎn)食品蛋白

在基因，遺傳疾病研究中運(yùn)用廣泛，許多遺傳性疾病的基因都和酵母基因有很高的同源性，研究酵母基因的編碼以及其真核蛋白表達(dá)的蛋白可加深對這些疾病的了解，與哺乳動物系統(tǒng)相比只能表達(dá)簡單修飾的蛋白

釀酒酵母表達(dá)

機(jī)理清楚，遺傳操作簡單； 沒有特異型病毒，成本低； 可能會超糖基化；產(chǎn)生乙醇對細(xì)胞具有毒性

昆蟲

表達(dá)系統(tǒng)

細(xì)胞表達(dá)量高；表達(dá)的外源基因片段很大，最大可達(dá)到 200KD； 可實(shí)現(xiàn)蛋白的糖基化和磷酸化修飾；投入成本較高

昆蟲系統(tǒng)適用于表達(dá)高等真核生物蛋白 可大規(guī)模懸浮培養(yǎng)，基礎(chǔ)研究，醫(yī)藥衛(wèi)生以及農(nóng)業(yè)。成本較酵母系統(tǒng)較貴，但比哺乳系統(tǒng)便宜

原核表達(dá)系統(tǒng)

大腸
桿菌
表達(dá)系統(tǒng)

基因表達(dá)產(chǎn)物時間短，操作簡單，背景簡單清楚，適用范圍廣； 表達(dá)出來的蛋白可能會以包涵體形式存在，不利于蛋白純化； 不能對目的蛋白進(jìn)行糖基化修飾，表達(dá)出來的蛋白需要內(nèi)毒素去除

表達(dá)的蛋白常用于制備抗體， 用于對蛋白活性沒有要求的蛋白表達(dá)；抗體疫苗的研究