HEK293技術(shù)平臺(tái)
人胚胎腎(HEK)293細(xì)胞及其衍生細(xì)胞系,極少表達(dá)細(xì)胞外配體所需的內(nèi)生受體,且擁有較高的轉(zhuǎn)染效率,是研究和表達(dá)外源基因的重要工具。其在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和蛋白互作研究、病毒包裝、快速小規(guī)模蛋白表達(dá)以及生物藥物生產(chǎn)過(guò)程中均有廣泛的應(yīng)用。
QuaCell?提供一系列化學(xué)成分限定的HEK293懸浮培養(yǎng)基,用于HEK293的快速懸浮馴化、長(zhǎng)期高密度培養(yǎng)、穩(wěn)轉(zhuǎn)及瞬轉(zhuǎn)表達(dá)。通用性培養(yǎng)體系可兼容包括293、293T、293FTM、293S、293SG、293SGGD在內(nèi)的所有HEK293細(xì)胞系。同時(shí)也能提供最專業(yè)的培養(yǎng)基個(gè)性化定制開(kāi)發(fā)及工藝優(yōu)化放大服務(wù),使客戶能輕松利用HEK293平臺(tái)高效快速表達(dá)病毒顆?;蚧钚缘鞍?。
描述
Wayne293? 瞬轉(zhuǎn)培養(yǎng)基是一款針對(duì)人類胚胎腎細(xì)胞293(HEK293)和其衍生細(xì)胞系瞬時(shí)化學(xué)轉(zhuǎn)染表達(dá)所研發(fā)的無(wú)血清、無(wú)動(dòng)物成分培養(yǎng)基,適用于HEK293系列細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)、化學(xué)轉(zhuǎn)染以及瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。
流程
圖1. HEK293F細(xì)胞在Wayne293?、HEK293CD(Cat.#A21001)及市售商品培養(yǎng)基Medium F中做Batch培養(yǎng)的表現(xiàn)。125ml搖瓶,工作體積30ml,φ26mm,125rpm,濕度75%,CO2 5%,37℃ 培養(yǎng)7天。
圖2. 不同種類HEK293細(xì)胞(HEK293、HEK293T、HEK293FT、HEK293F)在Wayne293?中做Batch培養(yǎng)的表現(xiàn)。125ml搖瓶,工作體積30ml,φ26mm,125rpm,濕度75%,CO2 5%,37℃ 培養(yǎng)7天。
圖3. 將帶EGPF熒光標(biāo)記基因的質(zhì)粒分別在Wayne293?和市售商品培養(yǎng)基Medium F中,轉(zhuǎn)染進(jìn)入HEK293F細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后按各自標(biāo)準(zhǔn)條件繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí),將細(xì)胞置于熒光顯微鏡下觀察,結(jié)果如圖。
圖4. HEK293F細(xì)胞在Wayne293?及市售商品培養(yǎng)基Medium F、Medium A、Medium B中轉(zhuǎn)染后的生長(zhǎng)及表達(dá)情況。按4中培養(yǎng)基各自的操作要求進(jìn)行轉(zhuǎn)染及培養(yǎng)。125ml搖瓶,工作體積30ml,濕度75%,CO2 5%,37℃培養(yǎng)7天。
圖5. 不同反應(yīng)器(TPP、搖瓶、發(fā)酵罐)工作體積下,HEK293F細(xì)胞在Wayne293?中瞬轉(zhuǎn)表達(dá)同一單抗的產(chǎn)量對(duì)比。CO2 5%,37℃ ,轉(zhuǎn)染后培養(yǎng)7天。隨著培養(yǎng)規(guī)模放大,產(chǎn)量波動(dòng)可控制在合理范圍之內(nèi)。