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抗體蛋白藥物親和力檢測 抗體藥物篩選,便捷.高效 準確 研錦生物

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抗原表位特異性的測定

在研究免疫原性時,ADAs的抗原表位特異性的測定十分 重要。根據(jù)FDA的建議(1),申請人應(yīng)該研究在抗原上 的哪些區(qū)域產(chǎn)生了免疫應(yīng)答:“FDA建議申請人直接針 對完整分子和內(nèi)源對應(yīng)物進行初步篩選試驗。然而,對 于產(chǎn)品幵發(fā),申請人應(yīng)該研究導(dǎo)致免疫響應(yīng)產(chǎn)生的特異 抗原區(qū)域或“抗原表位”。這種測定方法對于融合分子 可能尤為重要,因為兩個蛋白是通過基因或物理手段被 “融合”在一起的。可以在篩選階段就利用Biacore系統(tǒng) 進行抗原表位特異性的測定。一個便捷的方法就是固定 全長的藥物在一個流動池(Flow cell)中,同時固定藥 物的不同結(jié)構(gòu)域在其他流動池中。

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交叉反應(yīng)也可以采用相同的模式進行測定,但是在每個 流動池中固定不同的藥物。為了評估抗darbepoetin alfa 抗體是否存在潛在的對epoetin alfa的交叉反應(yīng),Mytych 等幵發(fā)了一種基于Biacore的雙流動池生物傳感器免疫檢 測法,其中含有一個固定有epoetin alfa通道(3)。這 種免疫檢測法被Amgen公司作為首選方法,用于檢測和 表征人血清中的抗epoetinalfa和抗darbepoetin alfa抗體。