乙型肝炎病毒(HBV)感染的流行病學(xué)是一個主要的全球健康問題。特別是，許多人是慢性HBV感染者，并且最有可能出現(xiàn)臨床表現(xiàn)，如慢性感染、肝硬化和肝細(xì)胞癌(HCC)。HBV屬于肝病毒科，它的基因組由一個環(huán)狀的、部分雙鏈的DNA組成

編碼幾種重要的結(jié)構(gòu)蛋白，如表面抗原(HBsAg)、e抗原、核心蛋白、逆轉(zhuǎn)錄酶和轉(zhuǎn)錄反式激活因子。急性暴露于HBV后2個月內(nèi)，血清中就會出現(xiàn)HBsAg，成為感染的血清學(xué)標(biāo)志。研究已經(jīng)證實(shí)，存在于HBV包膜外表面的前S1和前S2這兩個特定區(qū)域在HBV感染中起決定作用。

這兩個區(qū)域被認(rèn)為是能夠提供疫苗接種所提供的廣泛保護(hù)的關(guān)鍵表位。此外，一個含有前S2突變的轉(zhuǎn)基因模型被觀察到可誘發(fā)結(jié)節(jié)性不典型增生和HCC。這些前S區(qū)域的突變可導(dǎo)致HBsAg的低表達(dá)。據(jù)報(bào)道，不同的突變或缺失可導(dǎo)致抗HBsAg單克隆抗體結(jié)合親和力的降低。這些發(fā)現(xiàn)支持了前S區(qū)域的重要性，它們不僅可以誘導(dǎo)中和抗體，而且其變異可能與肝臟疾病的進(jìn)展相關(guān)。

 2018年9月1日，臺灣仁德醫(yī)學(xué)?？茖W(xué)校護(hù)理與管理醫(yī)學(xué)技術(shù)系團(tuán)隊(duì)在VIRAL IMMUNOLOGY在線發(fā)表了研究“Interaction of S17 Antibody with the Functional Binding Region of the Hepatitis B Virus Pre-S2 Epitope”。作者研究制備了針對HBV表面抗原前s2表位的單鏈抗體(scFv)。采用噬菌體展示技術(shù)從1例有HBV感染史的患者中分離到人源scFvs。通過Western blotting和酶聯(lián)免疫吸附測定對選擇的scFvs進(jìn)行重組HBsAg鑒定，以確定其結(jié)合能力。流式細(xì)胞術(shù)和免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示，S17單鏈抗體能夠識別HepG2215細(xì)胞膜上表達(dá)的內(nèi)源性HBsAg。此外，scFv S17與前S2表位的結(jié)合親和力為4.25×10-8M。通過合理的分子對接分析，發(fā)現(xiàn)scFv S17與前S2相互作用的主要驅(qū)動力是離子間的相互作用。這項(xiàng)研究為理解抗體和前S2表位之間的相互作用提供了結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。功能性scFv在未來的免疫治療中具有潛在的應(yīng)用價值。

作者探討了scFv S17與前S2表位之間的相互作用。使用OpenSPR儀器進(jìn)行了肽和抗體結(jié)合分析。100μL溶解于PBS中的前S2肽(100 μg/mL)作為靶點(diǎn)，固定在鏈霉親和素傳感器芯片上。運(yùn)行緩沖液為PBS，恒定流速為20 uL/ min。將ScFv S17溶于流動緩沖液中，濃度為0.83 ~ 3.34 μM用于實(shí)驗(yàn)。每次注射scFv S17后，使用10 mM甘氨酸鹽酸 (pH 2)再生傳感器芯片，流速為150 μL/min。最后，使用Trace Drawer軟件記錄和分析數(shù)據(jù)。利用TraceDrawer軟件，按照1∶1的結(jié)合模型，分析scFv S17與前S2肽相互作用的動力學(xué)參數(shù)。

研錦生物可以利用基于靶點(diǎn)或小分子結(jié)構(gòu)的藥物設(shè)計(jì)方法，對可購買化合物、天然產(chǎn)物等數(shù)據(jù)庫進(jìn)行虛擬篩選，并獲得潛在活性的化合物列表供進(jìn)一步活性實(shí)驗(yàn)確證。面向制藥企業(yè)和科研院所，可提供一站式的早期藥物研發(fā)服務(wù)，包括虛擬藥物篩選、先導(dǎo)優(yōu)化、靶標(biāo)預(yù)測、 動力學(xué)模擬等，涉及小分子化學(xué)藥、生物藥、中藥等多種新藥類型，為您提供優(yōu)質(zhì)的藥物發(fā)現(xiàn)服務(wù)