微量熱泳動(MicroScale Thermophoresis,MST) 是一種定量分析生物分子間相互作用的前沿技術(shù)。
通過精確檢測熒光變化,結(jié)合靈敏的熱泳動現(xiàn)象,MST 提供了一種靈活、強大和快速測量分子間相互作用的方法。
微量熱泳動(MST)檢測分子在微觀溫度梯度場中的運動,探測其水化層、電荷以及分子大小的變化。
MST將熒光檢測的精準性與熱泳動的靈活性及靈敏度結(jié)合起來,快速、可信地檢測分子間相互作用。
圖1 實驗示意圖
從分子對接分析表明,葛根素和槲皮素與ACE2具有良好的結(jié)合親和力,研究者并通過表面等離子體共振(SPR)驗證了這一點。
MST 測試時,由紅外激光建立微觀溫度梯度場,通過熒光染料標記、熒光融合蛋白、色氨酸自發(fā)熒光等信號追蹤,分子在微觀溫度梯度場中的定向移動就可以被探測和量化。
MST 應(yīng)用范圍廣泛,可用于檢測小分子之間、蛋白和蛋白之間、多蛋白復合物之間的相互作用。
MST 在緩沖液中操作,無需任何表面固定,因此即使對于體積較大、不穩(wěn)定的樣品,比如脂質(zhì)體、納米材料或者膜蛋白,也同樣適用。
親和力檢測:(Kd,解離常數(shù))pM/nM 至 mM
樣品種類:蛋白、多肽、核糖體、離子、核小體、脂質(zhì)體等
可直接在脂質(zhì)體或去垢劑溶液中測試膜蛋白
適于復雜體系研究,如三聚體組裝、蛋白組裝方式、抑制效應(yīng)、協(xié)同效應(yīng)
可在任意緩沖液中測試,包括含有復雜去垢劑的混合液
可在生理條件下,如在血清、細胞裂解液中檢測相互作用
蛋白寡聚化研究
蛋白聚集檢測
結(jié)合能研究、ΔG(自由能)、ΔH(焓)和ΔS(熵)
關(guān)注“研錦生物”
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